早癌篩查技術(shù):細(xì)胞DNA倍體定量分析與診斷
近年來(lái),我國(guó)惡性腫瘤的發(fā)病率和病死率一直呈上升趨勢(shì),惡性腫瘤死亡已經(jīng)成為我國(guó)城鎮(zhèn)居民人口死亡的首要原因。由于惡性腫瘤早期癥狀不明顯,大部分發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)是中期或者晚期。所以,早期、及時(shí)、準(zhǔn)確診斷腫瘤,能夠?yàn)榛颊郀?zhēng)取及早的治療時(shí)機(jī),能夠很大程度上少惡性腫瘤患者的病死率。
技術(shù)原理
惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特征是腫瘤細(xì)胞失控性增殖,而細(xì)胞失控性增殖的生物學(xué)基礎(chǔ)是細(xì)胞周期調(diào)控紊亂。脫氧核糖核酸(DNA)是細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和增殖的基礎(chǔ),也是細(xì)胞遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)。
每一個(gè)正常細(xì)胞有固定的DNA含量,通常用DNA指數(shù)(DNA index)或c(content)為單位。當(dāng)細(xì)胞處于G1/G0期時(shí),細(xì)胞DNA含量為DI=1或2c。當(dāng)細(xì)胞處于增殖期時(shí),DNA含量可倍增,表達(dá)為DI=2或4c。
細(xì)胞在癌變過(guò)程中,細(xì)胞核的大小、核內(nèi)DNA含量及DNA在細(xì)胞核內(nèi)的分布和排列形式等都會(huì)發(fā)生改變,而這種改變是細(xì)胞癌變過(guò)程中最早期的變化。DNA倍體定量分析檢測(cè)正是利用了這一規(guī)律,在DNA含量發(fā)生異常時(shí)就可以檢測(cè)出來(lái),所以說(shuō)這是一種超早期檢查;與細(xì)胞形態(tài)學(xué)相比,可以提前3~5年發(fā)現(xiàn)早期的瘤變細(xì)胞從而進(jìn)行預(yù)防和相關(guān)臨床處理。
細(xì)胞DNA定量分析,使用福爾根(Feulgen)染色法對(duì)細(xì)胞核染色來(lái)測(cè)量DNA含量;通過(guò)光學(xué)自動(dòng)三維移動(dòng)平臺(tái)對(duì)經(jīng)過(guò)福爾根染色的細(xì)胞核進(jìn)行自動(dòng)掃描,并進(jìn)行細(xì)胞核的積分光密度值(IOD)及核面積等513個(gè)參數(shù)的測(cè)定,計(jì)算DNA指數(shù)(DI)或DNA含量(c)。人工智能分析系統(tǒng)根據(jù)不同細(xì)胞成份所具有的不同特征參數(shù)來(lái)完成自動(dòng)細(xì)胞分類(lèi)和計(jì)數(shù)過(guò)程。如正常上皮細(xì)胞,增生或癌變細(xì)胞,淋巴細(xì)胞及未參與診斷的垃圾細(xì)胞(重疊細(xì)胞核,聚焦不良細(xì)胞核和核碎片等)。掃描分析全過(guò)程采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照(內(nèi)對(duì)照+外對(duì)照)質(zhì)量控制方法。根據(jù)細(xì)胞DNA定量分析系統(tǒng)診斷軟件做出細(xì)胞DNA定量分析,可發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中異倍體細(xì)胞,判斷出標(biāo)本內(nèi)是否含有癌前病變細(xì)胞及癌細(xì)胞。
臨床應(yīng)用
細(xì)胞DNA定量分析與診斷技術(shù)可運(yùn)用于各種細(xì)胞學(xué)標(biāo)本,包括宮頸脫落細(xì)胞、痰液、口腔刷取物、各種內(nèi)鏡刷取物、灌洗液、沖洗液、體腔積液、尿液、組織印片、細(xì)針穿刺細(xì)胞涂片等,尤其對(duì)早期宮頸癌的檢出率達(dá)到95%以上。
例如,子宮頸癌,從早期病變發(fā)展為癌約需經(jīng)歷5-10年時(shí)間,這段時(shí)間可能患者無(wú)任何不適、無(wú)明顯癥狀及體征,但宮頸細(xì)胞DNA定量檢測(cè)技術(shù)在此階段可以及時(shí)診斷出早期病變,而宮頸癌早期治愈率幾乎達(dá)到100%。宮頸癌防治技術(shù)成熟:細(xì)胞學(xué)、陰道鏡、組織病理學(xué)檢查是宮頸癌篩查的三個(gè)階梯,在細(xì)胞學(xué)檢查中,DNA倍體分析是目前較為先進(jìn)的技術(shù)。
該技術(shù)用于早癌篩查,其結(jié)果可靠,敏感性高,可重復(fù)性好。
該技術(shù)可用于宮頸癌、膀胱癌、口腔癌、肺癌等腫瘤的早期篩查。
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